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高效液相色譜分析時如何選擇流動相?

更新時間:2022-08-26      點擊次數(shù):1932
  高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。
  高效液相色譜儀分析時流動相的選擇原則:
  1.選擇色譜醇的溶劑作為流動相
  不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相,應避免不必要的浪費,防止污染環(huán)境,危害身體健康。應該根據(jù)樣哦數(shù)量,計算需要使用的溶劑體積,添加適量流動相到試劑瓶中作為流動相。因為有些有機溶劑長期放置易變質(zhì),比如四氫呋喃在光照下就容易變質(zhì),甲醇或乙醇長期放置會生成酯類,乙腈水溶液會分解為醋酸與氨,在分析時導致基線抬高,對一些分析,特別是質(zhì)譜分析造成影響。
  高效液相色譜流動相的選擇原則
  2.配置某些酸或堿性流動相時要考慮色譜柱的使用pH范圍
  有些酸并不適宜作為流動相,如鹽酸、長期使用可能損壞泵及相關的鋼制管線。注意選擇合適的截止波長的溶劑作為流動相。
  紫外分析時,樣品的檢測波長至少應大于所用溶劑的截止波長20nm上。
  3.配置的鹽溶液一定用濾膜過濾
  常規(guī)液相用0.45µm濾膜過濾,高效液相色譜使用0.2µm濾膜過濾。水或緩沖鹽溶液好置于棕色瓶中,以防長菌,阻塞溶劑過濾器,降低泵的操作性能。質(zhì)譜分析不能使用不揮發(fā)性鹽作為流動相。使用揮發(fā)性鹽作為流動相時,在保證分析的條件下,流動相中的鹽盡量保持低濃度。
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